Амидаза (AMD)
Ферменты:Являются ли макромолекулярные биологические катализаторы, большинство ферментов представляют собой белки?
Амидаза:Катализируют гидролиз различных эндогенных и чужеродных алифатических и ароматических амидов путем переноса ацильной группы на воду с образованием свободных кислот и аммиака. Гидроксамовые кислоты и другие органические кислоты широко используются в качестве лекарственных средств, поскольку они входят в состав факторов роста, антибиотиков и ингибиторов опухолей. Амидазы можно разделить на ацилазы R-типа и S-типа в зависимости от стереоселективности катализатора.
Помимо катализа гидролиза амидов, амидаза также может катализировать реакции переноса ацильной группы в присутствии косубстратов, таких как гидроксиламин.
Амидазы, полученные из разных источников, обладают различной субстратной специфичностью: некоторые из них способны гидролизовать только ароматические амиды, другие — только алифатические амиды, а третьи — α- или ω-аминоамиды. Большинство аминов обладают хорошей каталитической активностью только в отношении ациклических или простых ароматических амидов, но в отношении сложных ароматических соединений, особенно гетероциклических амидов, особенно амидов с орто-заместителями, активность обычно низкая (лишь немногие ферменты демонстрируют лучшие каталитические эффекты).
Каталитический механизм:
| Ферменты | Код товара | Код товара |
| Ферментный порошок | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | набор из 19 амидаз, по 50 мг каждая, 19 единиц * 50 мг/единица, или другое количество |
| Набор для скрининга (SynKit) | ES-AMD-1900 | Набор из 19 амидаз, по 1 мг каждая, 19 единиц * 1 мг/единица |
★ Высокая субстратная специфичность.
★ Высокая хиральная селективность.
★ Высокая эффективность конверсии.
★ Меньше побочных продуктов.
★ Мягкие условия реакции.
★ Экологически чистый продукт.
➢ Из-за субстратной специфичности следует проводить скрининг ферментов для конкретных субстратов, чтобы получить фермент, который катализирует целевой субстрат с наилучшим каталитическим эффектом.
➢ Никогда не допускайте контакта с экстремальными условиями, такими как: высокая температура, высокий/низкий уровень pH и органические растворители высокой концентрации.
➢ Обычно реакционная система должна включать субстрат и буферный раствор (оптимальный pH реакции фермента). Косубстраты, такие как гидроксиламин, должны присутствовать в системе реакции ацильного переноса.
➢ AMD следует добавлять в реакционную систему в последнюю очередь при оптимальном pH и температуре реакции.
➢ Для всех видов кислых шахтных вод существуют различные оптимальные условия реакции, поэтому каждый из них следует дополнительно изучать индивидуально.
Пример 1(1):
Активность гидролиза различных амидных субстратов
| Субстрат | Конкретная деятельность мкмоль мин-1mg-1 | Субстрат | Конкретная деятельность мкмоль мин-1mg-1 |
| Ацетамид | 3.8 | ο-OH бензамид | 1.4 |
| Пропионамид | 3.9 | p-OH бензамид | 1.2 |
| Лактамид | 12.8 | ο-NH2бензамид | 1.0 |
| Бутирамид | 11.9 | p-NH2бензамид | 0,8 |
| Изобутирамид | 26.2 | ο-Толуамиде | 0.3 |
| Пентанамид | 22.0 | p-Толуамиде | 8.1 |
| Гексанамид | 6.4 | Никотинамид | 1.7 |
| Циклогексанамид | 19.5 | Изоникотинамид | 1.8 |
| Акриламид | 10.2 | Пиколинамид | 2.1 |
| Метакриламид | 3.5 | 3-фенилпропионамид | 7.6 |
| Пролинамид | 3.4 | Индол-3-ацетамид | 1.9 |
| Бензамид | 6.8 |
Реакцию проводили в 50 мМ фосфатном буферном растворе натрия, pH 7,5, при температуре 70 ℃.
| Амиды | Гидроксиламин | Гидразин |
| Ацетамид | 8.4 | 1.4 |
| Пропионамид | 18.4 | 3.0 |
| Изобутирамид | 25.0 | 22.7 |
| Бензамид | 9.2 | 6.1 |
Реакцию проводили в 50 мМ фосфатном буферном растворе натрия, pH 7,5, при температуре 70 ℃.
Соответствующие концентрации реагентов: амиды, 100 мМ (бензамид, 10 мМ); гидроксиламин и гидразин, 400 мМ; фермент 0,9 мкМ.
Пример 2(2):
Пример 3(3):
1. Д'Абуско А.С., Аммендола С. и др. Экстремофилы, 2001, 5:183-192.
2. Го Ф.М., У Дж.П., Ян Л.Р. и др. Биохимия процессов, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Чжэн Р. К., Цзинь Ц. Ц., У Ч. М. и др. Биоорганическая химия, 2017, доступно онлайн 7.
