Амидаза (АМД)
Ферменты:Являются макромолекулярными биологическими катализаторами, большинство ферментов являются белками.
Амидаза:Катализировать гидролиз различных эндогенных и чужеродных алифатических и ароматических амидов путем переноса ацильной группы на воду с образованием свободных кислот и аммиака.Гидроксамовые кислоты и другие органические кислоты широко используются в качестве лекарств, поскольку они входят в состав факторов роста, антибиотиков и ингибиторов опухолей.Амидазы можно разделить на ацилазы R-типа и S-типа в соответствии со стереоселективностью катализатора.
В дополнение к катализу гидролиза амидов амидаза также может катализировать реакции переноса ацила в присутствии косубстратов, таких как гидроксиламин.
Амидазы разных источников обладают разной субстратной специфичностью, некоторые из них могут гидролизовать только ароматические амиды, некоторые только гидролизовать алифатические амиды, а некоторые гидролизовать α- или ω-аминоамиды.Большинство аминов обладают хорошей каталитической активностью только для ациклических или простых ароматических амидов, но для сложных ароматических соединений гетероциклические амиды, особенно амиды с орто-заместителями, обычно имеют низкую активность (лишь некоторые ферменты проявляют лучшие каталитические эффекты).
Каталитический механизм:
| Ферменты | Код продукта | Код продукта |
| Ферментный порошок | ЕС-АМД-101~ ЕС-АМД-119 | набор из 19 амидаз по 50 мг 19 шт * 50мг/шт, или другое количество |
| Набор для скрининга (SynKit) | ЕС-АМД-1900 | набор из 19 амидаз по 1 мг 19 шт * 1мг/шт |
★ Высокая субстратная специфичность.
★ Сильная хиральная селективность.
★ Высокая эффективность преобразования.
★ Меньше побочных продуктов.
★ Мягкие условия реакции.
★ Экологически чистый.
➢ Скрининг ферментов следует проводить для конкретных субстратов из-за специфичности субстрата и получать фермент, который катализирует целевой субстрат с лучшим каталитическим эффектом.
➢ Никогда не контактируйте с экстремальными условиями, такими как: высокая температура, высокий/низкий pH и органический растворитель с высокой концентрацией.
➢ В норме реакционная система должна включать субстрат, буферный раствор (оптимальный рН реакции фермента).Косубстраты, такие как гидроксиламин, должны присутствовать в реакционной системе переноса ацила.
➢ AMD следует добавлять в последнюю очередь в реакционную систему с оптимальными рН и температурой реакции.
➢ Все виды ВМД имеют разные оптимальные условия реакции, поэтому каждый из них следует дополнительно изучать отдельно.
Пример 1(1):
Гидролизная активность к различным амидным субстратам
| Субстрат | Конкретная деятельность мкмоль мин-1mg-1 | Субстрат | Конкретная деятельность мкмоль мин-1mg-1 |
| ацетамид | 3,8 | ο-ОН бензамид | 1,4 |
| Пропионамид | 3,9 | p-ОН бензамид | 1,2 |
| лактамид | 12,8 | ο-NH2бензамид | 1,0 |
| бутирамид | 11,9 | p-NH2бензамид | 0,8 |
| изобутирамид | 26,2 | ο-Толуамид | 0,3 |
| пентанамид | 22,0 | p-Толуамид | 8.1 |
| гексанамид | 6.4 | никотинамид | 1,7 |
| Циклогексанамид | 19,5 | Изоникотинамид | 1,8 |
| акриламид | 10.2 | Пиколинамид | 2.1 |
| Метакриламид | 3,5 | 3-фенилпропионамид | 7.6 |
| пролинамид | 3.4 | Индол-3-ацетамид | 1,9 |
| Бензамид | 6,8 |
Реакцию проводили в 50 мМ буферном растворе фосфата натрия, рН 7,5, при 70°С.
| Амиды | Гидроксиламин | гидразин |
| ацетамид | 8.4 | 1,4 |
| Пропионамид | 18,4 | 3.0 |
| изобутирамид | 25,0 | 22,7 |
| Бензамид | 9.2 | 6.1 |
Реакцию проводили в 50 мМ буферном растворе фосфата натрия, рН 7,5, при 70°С.
Соответствующие концентрации реагентов: амиды, 100 мМ (бензамид, 10 мМ);гидроксиламин и гидразин, 400 мМ;фермент 0,9 мкМ.
Пример 2(2):
Пример 3(3):
1. Д'Абуско А.С., Аммендола С. и соавт.Экстремофилы, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al.Биохимия процессов, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Чжэн Р.К., Джин Дж.К., Ву З.М. и др.Биоорганическая химия, 2017, доступно онлайн 7.
